ASTM F3088-14
Стандартный метод испытаний для использования метода центрифугирования для количественной оценки/исследования адгезионных взаимодействий клеток и материала
- Стандартный №
- ASTM F3088-14
- Дата публикации
- 2014
- Разместил
- American Society for Testing and Materials (ASTM)
- состояние
- быть заменен
- ASTM F3088-22
- Последняя версия
- ASTM F3088-22
- сфера применения
- 4.1. Этот метод испытаний описывает метод клеточной адгезии, который можно использовать для определения процента отслоения при заданном RCF для клеток, которые прикрепились к подложке, как правило, на короткое время. Информация, полученная с помощью этого метода тестирования, может быть использована для получения полуколичественного измерения адгезии клеток к субстрату без покрытия или к субстрату с предварительно нанесенным покрытием по сравнению с эталонным (адгезивным) типом клеток на том же субстрате. Как описано в Reyes and Garcia (2003), рекомендуется использовать точку 50 % либо для концентрации лиганда, либо для RCF для наиболее надежного измерения прочности адгезии. Адгезия может варьироваться в зависимости от изменения фенотипа клеток или в результате специфических свойств поверхности. Субстрат может включать полистирол, обработанный тканевой культурой, биоматериалы или биоактивные поверхности. Если субстрат представляет собой гидрогель, необходимо соблюдать осторожность, чтобы избежать разрушения гидрогеля (т. е. оторвавшиеся клетки оторвали фрагменты геля). Покрытие может состоять (но не ограничиваться этим) из следующего: природных или синтетических биоматериалов, гидрогелей, компонентов внеклеточного матрикса (ECM), лигандов, адгезионных или биоактивных молекул, генов или генных продуктов. Концентрация клеток также имеет решающее значение, поскольку использование слишком высокой концентрации клеток может привести к отслоению клеток в виде листа, а не отдельных клеток. Этот подход центрифугирования, после его валидации, может быть применим для контроля качества (КК) и разработки продукции. Однако до тех пор, пока метод не будет коррелирован с другими показателями прикрепления клеток, текущий метод следует использовать параллельно с другими известными показателями клеточной адгезии. 4.2. Этот метод тестирования не охватывает методы тестирования для количественной оценки изменений в экспрессии генов или изменений биомаркеров, выявленных с помощью иммуноокрашивания. Этот метод испытаний дополнительно не распространяется на методы количественного анализа изображений. В некоторых случаях изменение адгезионных свойств может отражаться на степени дифференцировки или дедифференцировки клеток. Однако стоит отметить, что адгезионные взаимодействия не обязательно отражают состояние дифференцировки определенного типа клеток, хотя во многих случаях они отражают. (Применение к адгезии хондроцитов см. в X1.3.) 1.1. Этот метод испытаний охватывает анализ клеточной адгезии центрифугированием, который можно использовать для обнаружения изменений в адгезионных характеристиках клеток при пассаже или обработке. Этот подход измеряет силу, необходимую для отделения клеток от подложки. Адгезия, среди многих переменных, может варьироваться из-за изменений фенотипа клеток. 1.2. Настоящий метод испытаний не распространяется на методы проверки однородности покрытия поверхностей, а также на методы определения характеристик поверхностей. 1.3. Клетки могут включать взрослые клетки, клетки-предшественники или стволовые клетки любого вида. Типы клеток могут включать хондроциты, фибробласты, остеобласты, островковые клетки или другие соответствующие типы прикрепленных клеток. 1.4. Этот метод испытаний не распространяется на методы выделения или сбора клеток. Этот метод тестирования не распространяется на методы тестирования для количественной оценки изменений экспрессии генов или изменений типа или концентрации биомаркеров, выявленных с помощью иммуноокрашивания. Этот метод испытаний также не охватывает методы количественного анализа изображений. 1.5. Настоящий стандарт не претендует на решение всех проблем безопасности, если таковые имеются, связанных с его использованием. Пользователь настоящего стандарта несет ответственность за установление соответствующих мер безопасности и охраны труда и определение применимости нормативных ограничений перед использованием.
ASTM F3088-14 Ссылочный документ
- ASTM F2603 Стандартное руководство по интерпретации изображений полимерных тканевых каркасов
- ASTM F2664 Стандартное руководство по оценке прикрепления клеток к поверхности биоматериала физическими методами
- ASTM F2739 Стандартное руководство по количественной оценке жизнеспособности клеток и связанных с ней атрибутов в каркасах биоматериалов
- ASTM F2944 Стандартная практика автоматического анализа колониеобразующих единиц (КОЕ) — метод получения изображений и анализа для подсчета и характеристики клеток и колоний в культуре
ASTM F3088-14 История
- 2022 ASTM F3088-22 Стандартная практика использования метода центрифугирования для количественной оценки/исследования адгезионных взаимодействий клеток и материала
- 2014 ASTM F3088-14 Стандартный метод испытаний для использования метода центрифугирования для количественной оценки/исследования адгезионных взаимодействий клеток и материала
