ASTM F2149-01(2007) Стандартный метод испытаний для автоматического анализа клеток — метод зоны электрического зондирования для подсчета и определения размера суспензий отдельных клеток
Этот анализ используется в университетских лабораториях культуры тканей, государственных исследовательских и больничных, биомедицинских и фармацевтических лабораториях для автоматизации подсчета и определения размера клеток. Этот прибор обеспечивает очень быстрые, точные и точные результаты для любого учреждения по культуре тканей. Кроме того, как уже отмечалось, поскольку размеры клеток, подлежащих анализу с помощью прибора, задаются пользователем, анализы можно проводить практически на любых видах клеток и типах клеток; он не ограничивается клетками человека или клетками крови. Методология зон электрического зондирования была внедрена в середине 1950-х годов (9). С тех пор произошли существенные улучшения, которые повысили удобство использования для оператора. Среди них — отказ от ртутного манометра, уменьшенный размер, большая автоматизация и наличие комплексных статистических компьютерных программ. Этот прибор обеспечивает быстрый результат в отличие от ручного подсчета клеток с использованием стандартной счетной камеры - гемоцитометра. Известно, что счетная камера имеет погрешность от 10 до 30 %, а также требует очень много времени (10). Кроме того, при подсчете и определении размера свиных гепатоцитов Стегеманн и др. пришли к выводу, что автоматизированный метод зон электрического зондирования обеспечивает значительно большую точность, прецизионность и скорость как для подсчета, так и для размера, по сравнению с традиционным микроскопическим методом или методом, основанным на клеточной массе. (7).1.1 Этот метод испытаний, при условии понимания ограничений, охватывает процедуру как подсчета, так и измерения распределения по размерам большинства всех типов клеток. Приборы позволяют пользователю выбирать настройки размера ячеек, следовательно, этот метод тестирования не ограничивается конкретными типами клеток. Этот метод подходит как для суспензионных, так и для адгезивных клеточных культур (). Это количественный лабораторный метод, не предназначенный для онлайнового или полевого использования. Результаты могут быть представлены как количество клеток на миллилитр или общее количество клеток на объем анализируемой клеточной суспензии. Как количество, так и распределение по размерам могут быть выражены в микронном диаметре или объеме клетки в фемтолитрах. 1.2 Клетки, обычно используемые в тканеинженерных медицинских продуктах (), регулярно анализируются. Примерами являются хондроциты (), фибробласты () и кератиноциты (). Szabo и др. использовали этот метод как для измерения количества островков поджелудочной железы, так и для измерения их объема (). Кроме того, для подсчета и анализа распределения по размерам свиных гепатоцитов, помещенных в экстракорпоральные системы помощи печени с картриджами из полых волокон, использовалось оборудование, использующее технологию электрических сенсорных зон. В этом исследовании () и других (, ) метод автоматических зон электрического зондирования был явно подтвержден на превосходную точность и точность по сравнению с традиционным ручным методом, визуальным подсчетом клеток под микроскопом с использованием гемоцитометра. Эта проверка была продемонстрирована на широком спектре типов клеток. Кроме того, автоматизированная процедура является быстрой, надежной и экономически эффективной; это также сводит к минимуму различия между операторами, присущие ручным методам. 1.3. Это оборудование производится различными компаниями; однако во всех случаях используется электрический импеданс. Этот метод испытаний для подсчета и определения размера клеток основан на обнаружении и измерении изменений электрического сопротивления, создаваемого клеткой, подвешенной в проводящей жидкости, проходящей через небольшое отверстие (см. ()). Когда клетки суспендируются в проводящей жидкости, например, в фосфатно-солевом буфере, они функционируют как дискретные изоляторы. Когда клеточная суспензия протягивается через небольшое цилиндрическое отверстие, прохождение каждой клетки изменяет импеданс электрического пути между двумя погруженными электродами, расположенными на каждой стороне отверстия. ......
ASTM F2149-01(2007) История
2016ASTM F2149-16 Стандартный метод испытаний для автоматического анализа клеток – метод зоны электрического зондирования для подсчета и определения размера суспензий отдельных клеток
2001ASTM F2149-01(2007) Стандартный метод испытаний для автоматического анализа клеток — метод зоны электрического зондирования для подсчета и определения размера суспензий отдельных клеток
2001ASTM F2149-01 Стандартный метод тестирования для автоматического анализа клеток8212; метод зоны электрического зондирования для подсчета и определения размера суспензий отдельных клеток