ASTM E3042-16
Стандартная практика для технологического этапа инактивации ретровируса грызунов с помощью обработки Тритоном Х-100

Стандартный №

ASTM E3042-16

Дата публикации

2016

Разместил

American Society for Testing and Materials (ASTM)

Последняя версия

ASTM E3042-16

сфера применения

3.1 Линии клеток, полученные от грызунов, широко используются в производстве биофармацевтических препаратов, таких как моноклональные антитела и слитые белки Fc. Было показано, что эти клеточные линии содержат гены, кодирующие эндогенные ретровирусоподобные частицы или эндогенный ретровирус. Несмотря на отсутствие доказательств связи между такими ретровирусами грызунов и заболеваниями у людей, потенциальное заражение терапевтических средств для людей вызывает обеспокоенность по поводу безопасности биофармацевтических препаратов. Кроме того, в процесс производства биофармацевтических лекарственных веществ могут быть введены посторонние агенты, такие как вирусы, из других источников, и к этим потенциально неизвестным факторам могут быть отнесены потенциальные проблемы безопасности. По этим причинам эффективное удаление вирусов является важным аспектом комплексного подхода, сочетающего тестирование безопасности и характеристику процесса, который обеспечивает вирусную безопасность биофармацевтических лекарственных препаратов, изготовленных с использованием линий клеток грызунов. 3.2 Инактивация растворителем/детергентом широко использовалась на протяжении десятилетий для инактивации оболочечных вирусов в биофармацевтических препаратах, полученных из плазмы крови (1-3).3 Системы растворитель/детергент с использованием детергентов Тритон Х-100 или Полисорбат 80 вместе с органический растворитель три(н-бутил)фосфат (TNBP) использовался для инактивации вирусов с оболочкой путем разрушения оболочки вируса, тем самым снижая способность вируса с оболочкой прикрепляться к клетке-хозяину и затем инфицировать ее (4 и 5). 3.3. Большинство производителей моноклональных антител, рекомбинантных белков и слитых белков Fc сосредоточились на методах инактивации вируса с использованием детергента Тритон Х-100 или Полисорбата 80 в отсутствие TNBP (6), который может мешать последующей биообработке. шаги. Способность детергентов инактивировать ретровирусы была продемонстрирована на моноклональных антителах, полученных в клеточных линиях, полученных от грызунов (6-9). На семинаре 2011 года, посвященном этапам очистки от вирусов, используемым в биопереработке (7), исследователи одной фирмы продемонстрировали инкубацию с 0,2% Тритоном Х-100 в течение 60 минут при температуре окружающей среды, инактивировавшую >5 log10 X-MuLV в четырех отдельных МКА в матрицах клеточных культур. 3.3.1 На том же семинаре 2011 года (7) исследователи второй фирмы подтвердили, что уровни концентрации белка и концентрации липидов не оказывают заметного влияния на инактивацию вируса MuLV при уровнях 0,3% Тритона Х-100. Кроме того, восемь различных культуральных жидкостей клеток-хозяев (HCCF) с моноклональными антителами обрабатывали 0,3% тритоном Х-100 в течение 60 минут выдержки при 20°С. Эффективная инактивация, &#≥4 log10 инактивации......

ASTM E3042-16 История

• 2016 ASTM E3042-16 Стандартная практика для технологического этапа инактивации ретровируса грызунов с помощью обработки Тритоном Х-100