Этот метод измеряет концентрацию АТФ, присутствующую в образце. АТФ входит в состав всех живых клеток, включая бактерии и грибы. Следовательно, наличие АТФ является индикатором тотальной микробной обсемененности металлообрабатывающих жидкостей. АТФ не связана с веществами небиологического происхождения. Метод D 4012 подтвердил, что АТФ является заменой данных о культивируемых бактериях (Руководство E 1326). Этот метод отличается от метода D 4012 тем, что он устраняет помехи, которые исторически делали непригодным тестирование АТФ со сложными органическими жидкостями, такими как MWF. Тест АТФ обеспечивает быстрые результаты теста, которые отражают общую бионагрузку в образце. Таким образом, это сокращает задержку между началом теста и сбором данных с 36 до 48 часов (или дольше), необходимых для того, чтобы культивируемые колонии стали видимыми, до примерно пяти минут. Хотя данные АТФ сильно согласуются с данными культивирования в MWF, на концентрацию АТФ влияют другие факторы, чем те, которые влияют на культивируемость. На возможность культивирования влияет, прежде всего, способность захваченных микробов размножаться на предоставленной питательной среде в конкретных условиях роста. Было подсчитано, что менее 1% видов, присутствующих в образце окружающей среды, образуют колонии при любом заданном наборе условий роста. На концентрацию АТФ влияют: присутствующие виды микробов, физиологическое состояние этих видов и общая бионагрузка (см. Приложение X1). Одним из примеров видового эффекта является то, что количество АТФ на клетку значительно больше у грибов, чем у бактерий. Внутри вида клетки, которые более метаболически активны, будут иметь больше АТФ на клетку, чем спящие клетки. Чем больше общая бионагрузка, тем выше концентрация АТФ в образце. Существует вероятность того, что этап промывки (11.15) не сможет удалить все химические вещества, которые могут помешать реакции биолюминесценции (11.39). Наличие любых таких помех можно оценить, выполнив серию стандартных дополнительных испытаний, как описано в Приложении X3. Любое воздействие мешающих химических веществ будет отражено как погрешность по отношению к данным, полученным из жидкости, не содержащей мешающих химических веществ. 1.1. Метод обеспечивает протокол для улавливания, извлечения и количественного определения содержания аденозинтрифосфата (АТФ), связанного с микроорганизмами, обнаруженными в смешивающихся с водой средах. жидкости для металлообработки (MWF). 1.2 АТФ измеряется с помощью биолюминесцентного ферментативного анализа, при котором свет генерируется в количествах, пропорциональных концентрации АТФ в образцах. Свет производится и измеряется количественно в относительных световых единицах (RLU), которые путем сравнения со стандартом АТФ и вычислений преобразуются в пг АТФ/мл. 1.3 Этот метод одинаково пригоден для использования как в лаборатории, так и в полевых условиях. 1.4 Метод определяет концентрации АТФ в диапазоне от 4,0 пг АТФ/мл до 400 000 пг АТФ/мл. 1.5. Если помехи можно преодолеть, биолюминесценция является надежным и проверенным методом квалификации и количественного определения АТФ. Метод не различает АТФ из разных источников, например, из разных видов микроорганизмов, таких как бактерии и грибы. 1.6 Значения, указанные в SI, следует считать стандартными. 1.7 Настоящий стандарт не претендует на решение всех проблем безопасности, если таковые имеются, связанных с его использованием. Пользователь настоящего стандарта несет ответственность за установление соответствующих мер безопасности и охраны труда и определение применимости нормативных ограничений перед использованием.
ASTM E2694-09 История
2021ASTM E2694-21 Стандартный метод определения содержания аденозинтрифосфата в смешивающихся с водой жидкостях для металлообработки
2016ASTM E2694-16 Стандартный метод определения содержания аденозинтрифосфата в смешивающихся с водой жидкостях для металлообработки
2011ASTM E2694-11 Стандартный метод определения содержания аденозинтрифосфата в смешивающихся с водой жидкостях для металлообработки
2009ASTM E2694-09 Стандартный метод определения содержания аденозинтрифосфата в смешивающихся с водой жидкостях для металлообработки