Наличие среды для роста клеток усложняет прямой анализ клеток с помощью SIMS. Попытки промыть питательную среду приводят к воздействию на клетки нефизиологических реагентов, что также может изменить их химический состав. Это препятствие преодолевается применением сэндвич-метода замораживания-разрыва (1). Этот криогенный метод предоставил уникальный способ отбора проб отдельных клеток в их нативном состоянии для SIMS-анализа. Описанная здесь процедура успешно использовалась для визуализации транспорта ионов Na+ и K+ (3), изменений кальция в стимулированных клетках (4,5), а также локализации терапевтических препаратов и меченых изотопами молекул в отдельных клетках (6). Замороженные лиофилизированные клетки, приготовленные в соответствии с этим методом, были проверены на эффекты матрицы SIMS (7). Количественная оценка ионного изображения также была достигнута в этом типе образца (8). Описанная здесь процедура применима к широкому спектру клеточных культур и позволяет изучать реакцию отдельных клеток на химические изменения в состоянии здоровья и болезни, а также локализацию меченных изотопами молекул и терапевтических препаратов в моделях клеточных культур.1.1 В этом руководстве аналитику вторичной ионной масс-спектрометрии (ВИМС) представлен криогенный метод анализа отдельных клеток культуры ткани, растущих in vitro. Данное руководство подходит для образцов замороженно-гидратированных и замороженно-лиофилизированных образцов. Включены процедуры корреляции оптической, лазерной сканирующей конфокальной и вторичной электронной микроскопии в дополнение к SIMS-анализу. 1.2 Это руководство не подходит для клеточных культур, которые не прикрепляются к подложке. 1.3 Это руководство не подходит для любых образцов клеточных культур, залитых в пластик. Этот стандарт не претендует на решение всех проблем безопасности, если таковые имеются, связанных с его использованием. Пользователь настоящего стандарта несет ответственность за установление соответствующих мер безопасности и охраны труда и определение применимости нормативных ограничений перед использованием.
ASTM E1881-06 Ссылочный документ
ASTM E673 Стандартная терминология, относящаяся к анализу поверхности
ASTM E1881-06 История
2020ASTM E1881-12(2020) Стандартное руководство по анализу клеточных культур с помощью SIMS
2012ASTM E1881-12 Стандартное руководство по анализу клеточных культур с помощью SIMS
2006ASTM E1881-06 Стандартное руководство по анализу клеточных культур с помощью SIMS
1997ASTM E1881-97(2002) Стандартное руководство по анализу клеточных культур с помощью SIMS
1997ASTM E1881-97 Стандартное руководство по анализу клеточных культур с помощью SIMS