Настоящий стандарт описывает метод жидкостной хроматографии и тандемной масс-спектрометрии для определения мелатонина в сыворотке, который подходит для определения мелатонина в сыворотке. Метод экстракции: Аккуратно перенесите образец объемом 1 мл в центрифужную пробирку объемом 15 мл, добавьте 50 мкл стандартного рабочего раствора дейтерированного мелатонина, добавьте 4 мл метанола и используйте вихревой смеситель для колебаний и экстракции в течение 5 минут. Центрифуга при 10000 g, 4 ℃ в течение 5 минут в низкотемпературной высокоскоростной центрифуге. Возьмите супернатант и пропустите его через мембранный фильтр 0,22 мкм для измерения методом жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии. Технические моменты 1: Метанол, как растворитель мелатонина, не влияет на стабильность целевого вещества в образце, но также может денатурировать и осаждать белок в сыворотке.Экспериментальная операция проста, и скорость его восстановления может достигать более 60 %, что вполне может удовлетворить потребности сыворотки в обнаружении мелатонина. Технический момент 2: Мелатонин в сыворотке экстрагируется метанолом, измеряется с помощью жидкостной хроматографии-тандем-масс-спектрометра и количественно определяется методом внутреннего стандарта. Этот стандарт предусматривает, что предел обнаружения мелатонина составляет 0,01 мкг/л, а предел количественного определения составляет 0,05 мкг/л; степень извлечения мелатонина этого стандартного метода составляет: 60 ~ 120%, в соответствии с GB/T ?27404 соответствует диапазон скорости восстановления при определенном уровне концентрации, относительное отклонение (RSD) ≤ 20%.
T/BDAS 002-2023 История
2023T/BDAS 002-2023 Определение содержания мелатонина в сыворотке крови — жидкостная хроматография-тандемная масс-спектрометрия.