T/CAICC 05-2021
Быстрое обнаружение изокарбофоса в китайских лекарственных материалах — иммунохроматография с коллоидным золотом. (Англоязычная версия)

Стандартный №

T/CAICC 05-2021

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2022

Разместил

Group Standards of the People's Republic of China

Последняя версия

T/CAICC 05-2021

сфера применения

3. Принцип Этот метод основан на принципе иммунохроматографии с конкурентным ингибированием. Изокарбофос в образце экстрагируется и объединяется со специфическим антителом, меченным коллоидным золотом, которое ингибирует комбинацию антитела и антигена на тест-линии (Т-линия) тест-полоски, что приводит к изменению цвета тестовая линия. Качественное определение изокарбофоса в образце проводят путем сравнения глубины цвета линии обнаружения и линии контроля качества (линия С). 4 Реагенты и материалы 4.1 Реагенты Если не указано иное, все реагенты являются аналитически чистыми, а лабораторная вода должна соответствовать требованиям для вторичной воды в GB/T6682. 4.1.1 Метанол (CH3OH). 4.1.2 Экстракционный раствор: снабжен тест-полосками для иммунохроматографии с коллоидным золотом или приготовлен в соответствии с его инструкциями. 4.1.3 Стандартный материал: См. в таблице 1 название на китайском, английском языке, регистрационный номер CAS, молекулярную формулу и относительную молекулярную массу эталонного материала изокарбофоса с чистотой ≥98%. Таблица 1. Китайское название, английское название, регистрационный номер CAS, молекулярная формула, относительная молекулярная масса эталонных изокарбофосовых веществ. Эквиваленты отслеживаемых веществ. 4.2 Приготовление раствора 4.2.1 Стандартный исходный раствор изокарбофоса (100 мкг/мл): Точно взвесьте 1 мг эталонного вещества изокарбофоса (4.1.3), поместите его в мерную колбу вместимостью 10 мл и используйте метанол (4.1.1). ) Растворите и доведите до метки, хорошо встряхните и приготовьте стандартный маточный раствор аммоний-фосфора с концентрацией 100 мкг/мл. Хранить при температуре 4°C в защищенном от света месте, срок годности 6 месяцев. 4.2.2 Стандартный рабочий раствор изокарбофоса (1 мкг/мл): Точно отберите пипеткой 0,1 мл исходного стандартного раствора изокарбофоса (100 мкг/мл) (4.2.1) и поместите в бутыль объемом 10 мл. , разбавляют до метки метанолом (4.1.1), хорошо встряхивают и готовят стандартный рабочий раствор фосфорноаммонийной концентрации 1 мкг/мл. Новая конфигурация для немедленного использования. 4.3 Материалы Тест-полоски для иммунохроматографии с коллоидным золотом Aminophos, применимая матрица - китайские медицинские материалы. Его необходимо хранить в прохладном, сухом и темном состоянии. 5 Приборы и оборудование 5.1 Электронные весы: Чувствительность 0,01g. 5.2 Гомогенизатор. 5.3 Центрифуга. 5.4 Устройство для продувки азотом. 5.5 Вихревой прибор. 5.6 Пипетка: 10 мкл~200 мкл, 100 мкл~1000 мкл. 6 Этапы анализа 6.1 Подготовка пробы Возьмите необходимое количество репрезентативной пробы, гомогенизируйте и тщательно перемешайте. 6.2 Экстракция пробы 6.2.1 Взвесьте 1 г пробы (с точностью до 0,05 г) для образцов Codonopsis pilosula, Radix Isatidis, Radix Astragali и солодки, поместите ее в центрифужную пробирку, добавьте 6 мл экстракта (4.1.2). ), встряхивают вверх и вниз в течение 30 секунд, центрифугируют при 3000 об/мин или выше в течение 3 минут, а надосадочную жидкость представляют собой тестируемую жидкость. 6.2.2 Образцы Bupleurum и Angelica Взвесьте 1 г образца (с точностью до 0,05 г) в центрифужную пробирку, добавьте 3 мл метанола (4.1.1), встряхивайте вверх и вниз в течение 30 с, 3000 об/центрифуга в течение более 3 минут; перенесите 0,6 мл надосадочной жидкости в центрифужную пробирку, высушите на водяной бане при температуре 50–60 ℃ в токе азота, добавьте 1 мл экстракта (4.1.2) и перемешайте на вортексе в течение 20 с. Жидкость для проверки. 6.3 Этапы определения Перед тестированием верните невскрытую тест-полоску в комнатную температуру. Внесите 100 мкл раствора исследуемого образца в отверстие для отбора проб на тест-полоске, проведите реакцию при комнатной температуре в течение 10 минут, а затем непосредственно определите результат. Примечание 1. При выполнении измерений рекомендуется следовать инструкциям к тест-полоскам. Примечание 2: Для определения результатов рекомендуется использовать измеритель показаний. Подробную информацию об использовании измерительного прибора см. в руководстве по эксплуатации прибора. 6.4 Испытание контроля качества Каждая партия образцов должна быть одновременно подвергнута холостому испытанию и дополнительному испытанию контроля качества. 6.4.1 Холостой тест: Взвесьте пустой образец и выполните шаги 6.2 и 6.3 так же, как и образец. 6.4.2 Добавление стандартного теста контроля качества Точно взвесьте 1 г холостого образца (с точностью до 0,05 г) в центрифужную пробирку, добавьте 50 мкл стандартного рабочего раствора изокарбофоса (1 мкг/мл) (4.2.2), сделайте концентрацию ацетонитрила в образце равной 0,05 мг/кг и выполните шаги 6.2 и 6.3 так же, как и образец. 7 Оценка результата 7.1. Измерение показаний счетчика следует выполнять в соответствии с инструкциями счетчика, считывать непосредственно и оценивать результат. 7.2 Визуальная оценка Результат оценивается путем сравнения глубины цвета линии контроля качества (линия C) и тестовой линии (линия T). На рисунке 1 представлена схематическая диаграмма визуального суждения. 7.2.1 Недействительная линия контроля качества (линия С) не окрашивается, независимо от того, окрашивается ли тестовая линия (линия Т) или нет, это указывает на то, что операция выполнена неправильно или тест-полоска недействительна, а результат теста является недействительным. неверный. 7.2.2 Если линия контроля качества (линия С) приобретает цвет при положительных результатах, но линия обнаружения (линия Т) не окрашивается или цвет светлее, чем линия контроля качества (линия С), это указывает на то, что содержимое Содержание изокарбофоса в образце превышает предел обнаружения метода и считается положительным. 7.2.3 Цвет линии контроля качества (линия С) меняется при отрицательных результатах, а цвет линии обнаружения (линия Т) темнее, чем цвет линии контроля качества (линия С) или в основном такой же, как цвет линии контроля качества (линия С), что свидетельствует о том, что водная аммонийная сера в пробе. Содержание фосфора ниже предела обнаружения метода, оценивается как отрицательное. Рисунок 1. Схема визуальной оценки 7.3. Требования к тесту контроля качества. Результат холостого теста должен быть отрицательным, а результат теста контроля качества с добавками должен быть положительным. 8. Подтверждение результатов. При положительном результате теста его следует подтвердить в соответствии со стандартами методов, указанными в «Китайской Фармакопее». 9 Показатели эффективности 9.1 Предел обнаружения: 0,05 мг/кг. 9.2 Чувствительность: ≥95%. 9.3 Специфичность: ≥90%. 9.4 Частота ложноотрицательных результатов: ≤5%. 9.5 Уровень ложноположительных результатов: ≤10%. Примечание. Метод расчета показателей эффективности см. в Приложении А. 10 Прочее Реагенты, информация о тест-полосках и этапы работы, описанные в этом методе, предназначены для удобства пользователей метода, и при использовании этого метода ограничений нет. Пользователи метода должны использовать проверенные реагенты и тест-полоски, соответствующие различным показателям эффективности, указанным в этом методе. Тест-полоски, используемые в этом методе, могут вступать в перекрестную реакцию с фосфорорганическими пестицидами, такими как изофенфосметил, и результаты должны быть подтверждены, когда результаты будут признаны положительными.

T/CAICC 05-2021 История

• 2022 T/CAICC 05-2021 Быстрое обнаружение изокарбофоса в китайских лекарственных материалах — иммунохроматография с коллоидным золотом.