T/AHFIA 043-2019
Определение α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты в жидкости методом ВЭЖХ. (Англоязычная версия)

Стандартный №

T/AHFIA 043-2019

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2019

Разместил

Group Standards of the People's Republic of China

Последняя версия

T/AHFIA 043-2019

сфера применения

Основные положения: Главы настоящего стандарта включают область применения, реагенты и материалы, основные инструменты, этапы определения, расчет результатов, прецизионность и предел обнаружения, неопределенность метода. Основные технические параметры и параметры экспериментальной проверки в этом стандарте следующие: 1. Подтверждение основных технических параметров 1.1 Выбор хроматографических колонок. Для эксперимента были выбраны два разных типа хроматографических колонок. Два типа хроматографических колонок: HSST3 и BEHC18. С помощью метода однофакторной переменной было окончательно установлено, что хроматографическая колонка BEHC18 обеспечивает лучшее разделение и может полностью разделять α-линоленовую кислоту и L-фенилмолочную кислоту. Хроматограмма представлена на рисунке 1. На рисунке 1 представлена: Хроматограмма стандартного образца 1.2 Эксперимент по подбору подвижной фазы Для подбора подвижной фазы сначала выбирают воду-метанол, уксусную кислоту-метанол, воду-ацетонитрил, метанол-фосфорную кислоту и т. д. для экспериментов. После экспериментов было обнаружено, что эффект был плохим и разделение не могло быть достигнуто. Было обнаружено, что использование фосфорной кислоты низкой концентрации будет играть большую роль в разделении двух веществ. 1%, 0,5% и 0,1% растворы фосфорной кислоты были приготовлены в качестве подвижных фаз для проведения экспериментов соответственно.Результаты экспериментов показали, что использование 0,1% фосфорной кислоты было более эффективным при разделении.Хорошо, форма пика хорошая, что соответствует требованиям использования.Поэтому в качестве подвижной фазы в эксперименте по разделению α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочная кислота. 1.3 Выбор длины волны: Путем поиска литературы и проведения экспериментов систематически обобщали и обобщали эксперимент на экспериментальном этапе.Сканированием в диапазоне длин волн 210-500нм получали соответствующее 3D-сканирование.После последующего извлечения хроматограмм и Литературные отчеты, чтобы определить лучшую длину волны обнаружения 205 нм. Проверка стандартного образца выполняет соответствующую проверку длины волны. 2. После того, как были определены технические параметры экспериментальной проверки, группа по установлению стандартов проверила эффект с помощью тестов точности, воспроизводимости, стабильности и восстановления. Относительные стандартные отклонения RSD% полученных результатов параллельных измерений были все менее 5, и их точность соответствовала методологическим требованиям, а также проводились дистанционные проверочные испытания и расчеты неопределенности метода для улучшения стандартизации, единообразия и научности этого метода. 2.1 Построение стандартной кривой Аккуратно абсорбируйте смешанный стандартный раствор α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты и приготовьте растворы с 5 концентрациями (концентрация стандартной кривой α-линоленовой кислоты: 20 мг/л, 40 мг/л, 80 мг/л, 160 мг/л, 400 мг/л; концентрация стандартной кривой L-фенилмолочной кислоты: 25 мг/л, 50 мг/л, 100 мг/л, 200 мг/л, 500 мг/л). Определите стандартный смешанный рабочий раствор пяти концентраций, используйте концентрацию по оси абсцисс и площадь пика по оси ординат для построения стандартной кривой; R2=0,998, хорошая линейность. 2.2 Прецизионность Для одной и той же пробы щелока параллельно готовили 6 проб в соответствии с методом пробоподготовки, и этим методом определяли α-линоленовую кислоту и L-фенилмолочную кислоту (одну пробу вводили повторно 6 раз), а также повторяемость и воспроизводимость результатов. Результаты испытаний на воспроизводимость представлены в Таблице 1 и Таблице 2. Таблица 1. Результаты испытаний на повторяемость α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты Количество позиций 1 2 3 4 5 6 RSD L-фенилмолочная кислота 44,1 44,57 44,73 44,96 44,84 45,08 2,20% α-Линоленовая кислота 50,53 49,74 50,47 50,96 50,52 51,39 1,10% Как показано в таблице 1, RSD шести повторных результатов измерений составляет 2,20% и 1,08%, а метод имеет хорошую повторяемость. Таблица 2 Результаты испытаний на воспроизводимость α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты Количество позиций 1 2 3 4 5 6 RSD L-фенилмолочная кислота 415,32 398,10 401,26 450,22 438,30 387,62 4,92% α-линоленовая кислота 399,62 396,24 402,64 401,28 40 4,64 403,16 7,46% Как видно из таблицы 2 выше, RSD результатов измерения воспроизводимости составляет 4,92% и 7,46%, что указывает на хорошую воспроизводимость. 2.3 Эксперимент по восстановлению пиков: Возьмите три образца с известным содержанием α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты: 48,62 мг/л и 15,45 мг/л соответственно, и используйте α-линоленовую кислоту и L-фенилмолочную кислоту с известными концентрациями. трех уровней концентрации были приготовлены с использованием стандарта молочной кислоты, обработаны и протестированы в соответствии с методом, описанным в стандарте.Все расчетные степени извлечения находились в пределах 80%-120%, как показано в таблице 3 ниже. Таблица 3. Экспериментальные результаты увеличения скорости извлечения α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты в образцах вина. Концентрация добавленного вещества-субстрата (мг/л) Добавленный уровень (мг/л) 40 100 400 Фактическое значение Скорость восстановления Фактическое значение Извлечение измеренных значения L-фенилмолочная кислота 15,45 47,95 81,25% 112,85 97,40% 346,07 82,66% α-линоленовая кислота 48,62 85,12 91,25% 145,92 97,30% 415,14 91,63% 2,4 Предел обнаружения и количественная оценка метода Этот метод ограничен следующим тестом на чувствительность: Тест на чувствительность включает в себя чувствительность прибора и чувствительность метода.Чувствительность прибора представляет собой предел обнаружения прибора.Минимальная концентрация смешанного стандартного раствора L-фенилмолочной кислоты и α-линоленовой кислоты с За предел обнаружения прибора принимается отношение сигнал/шум ≥ 3. Предел выхода, чувствительность метода выражается количественным пределом метода, а минимальная концентрация L-фенилмолочной кислоты с сигналом к -коэффициент шума ≥ 9 и смешанный стандартный раствор α-линоленовой кислоты принимают за количественный предел метода. Соответствующие полученные данные представлены в таблице 4. Таблица 4. Название данных предела количественного определения и предела обнаружения α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты в пробе спиртного напитка. Эксперимент по проверке за пределами объекта. Этот метод был проверен в лаборатории за пределами объекта с лабораторией жидкой фазы и качества жидкости в Аньхой Гуоке. Testing Technology Co., Ltd., и результаты представлены в Таблице 5. Таблица 5 Результаты лабораторного сравнения α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты в образцах вина

T/AHFIA 043-2019 История

• 2019 T/AHFIA 043-2019 Определение α-линоленовой кислоты и L-фенилмолочной кислоты в жидкости методом ВЭЖХ.