Тестирование контроля качества продуктов полногеномной амплифицированной ДНК в основном включает два аспекта: тестирование концентрации и тестирование электрофореза. Продукт ДНК должен иметь концентрацию не менее 30 нг/мкл и общее количество более 1 мкг после обнаружения Кубита, прежде чем можно будет продолжить анализ секвенирования; диапазон полос электрофореза продукта ДНК должен быть более 250 п.н., а верхний предел не более 2000 п.н., а основная полоса — 750 п.н. После того, как образцы проходят проверку контроля качества, они поступают на строительство библиотеки. Стартовая сумма на строительство библиотеки — 300 нг. В настоящее время фермент фрагментации двухцепочечной ДНК NEB используется для разрыва основной полосы на небольшие фрагменты ДНК длиной 150-200 п.н. Затем проводят очистку, и очищенную ДНК подвергают репарации концов, лигированию адаптера, ПЦР-амплификации и конструированию очищенной библиотеки. После того как библиотека пройдет количественный тест BMG, она будет секвенирована на машине.
T/SZGIA 3-2018 История
2018T/SZGIA 3-2018 Стандарт комплексного секвенирования в методах преимплантационного генетического скрининга