T/CSBM 0026-2022
Метод испытания минерализации биоактивного стекла in vitro (Англоязычная версия)

Стандартный №

T/CSBM 0026-2022

язык

Китайский, Доступно на английском

Дата публикации

2022

Разместил

Group Standards of the People's Republic of China

Последняя версия

T/CSBM 0026-2022

сфера применения

1. Реагенты для испытаний и испытательное оборудование 1.1. Реагенты для испытаний. Реагенты, используемые в тесте: а) NaCl (д.а.ч.); б) NaHCO3 (д.а.ч.); в) KCl (д.а.ч.); d ) KHPO4 3H20 (д.ч.); д) MgCl2 6H20 (д.ч.); е) раствор соляной кислоты (д.ч.) концентрацией 1моль/л; ж) CaCl2 (д.ч.); з) Na2SO4 (д.ч.); и) Трис (ч.д.а.); к) Деионизированная вода. 1.2 В испытаниях используются следующие тестеры: а) магнитная мешалка коллекторного типа; б) рН-метр; в) электронные аналитические весы: точность 0,001 г; г) стакан емкостью 2 л; д) мерный цилиндр емкостью 50 мл, 1 л; е) колба мерная 1 л; ж) бутыль из политетрафторэтилена: 1 л. 2. Приготовление двух обычно используемых растворов минерализации in vitro. 2.1. Буферный раствор Трис-HCl 2.1.1. Для приготовления буфера Трис-HCl необходимы следующие реагенты: а) Деионизированная вода: 700 мл; б) Трис: (6,00±0,50) г. в) Раствор соляной кислоты: 35 мл, концентрация 1 моль/л. 2.1.2. Шаг приготовления 2.1.2.1. Добавьте 35 мл раствора соляной кислоты с концентрацией 1 моль/л в 700 мл деионизированной воды при перемешивании. 2.1.2.2 Медленно добавляйте Трис, чтобы pH не превышал 7,45, и доведите значение pH до 7,40. 2.1.2.3 Разбавьте раствор с отрегулированным pH до 1000 мл, перенесите его в чистую бутылку из политетрафторэтилена с гладкой внутренней поверхностью и поставьте в холодильник при температуре 4°C для дальнейшего использования. Примечание: При использовании проверьте и убедитесь, что раствор Трис-HCl находится в прозрачном состоянии. Если он мутный, его больше нельзя использовать и его следует приготовить заново, а срок годности использования составляет 30 дней. 2.2 Имитированные жидкости организма 2.2.1 Необходимые реагенты Реагенты и дозировка, необходимые для приготовления имитированных жидкостей организма, показаны в Таблице 1. Таблица 1 Приготовление реагентов и дозировка, необходимая для моделирования биологических жидкостей Реагент nbsp;;nahco30,355г 3 KCl0,225г 4KHPO4·3H2O0,231г 5MgCl26H200,311г 6Раствор соляной кислотыa39 мл 7CaCl20,292 г 8 Na2SO4 2.2.2.1 Добавьте в стакан 700 мл деионизированной воды, перемешайте и доведите температуру воды до (36,5±1,5)°C. 2.2.2.2 Растворите по одному при (36,5±1,5)°C в порядке, указанном в таблице 1. Реагент 1–8. 2.2.2.3 Температура раствора постоянная (36,5±1,5)℃. После взвешивания реагента 9 медленно добавьте небольшое количество в смешанный раствор несколько раз и перемешивайте до его полного растворения. 2.2.2.5 Разбавьте раствор с отрегулированным pH до 1000 мл и перенесите его в чистую бутылку, поместите в гладкую бутылку из политетрафторэтилена и поставьте в холодильник при температуре 4–8 °C для дальнейшего использования. Примечание: во время приготовления Процесс, несколько реагентов не могут быть растворены одновременно, и следующий реагент должен быть добавлен после полного растворения предыдущего реагента. Взвешивание гигроскопического реагента. Действие должно быть как можно более быстрым, и весь процесс приготовления должен гарантировать, что Раствор бесцветен и прозрачен, на поверхности емкости не выпадает осадок. При выпадении осадка в процессе процесса раствор выливают и моют посуду для повторного приготовления. 3Минерализация материалов in vitro 3.1  ;Плотный чешуйчатый материал 3.1.1Для плотного чешуйчатого материала измерьте размер образца и рассчитайте площадь поверхности образца. Примените формулу (1) для расчета количества минерализующего раствора in vitro: Vs=Sa/10……… …( 1) В формуле: Vs — — объем минерализованной жидкости in vitro, в миллилитрах (мл); Sa — — площадь поверхности образца, в квадратных миллиметрах (мм2). 3.1.2 Согласно этому соотношению отношение площади поверхности образца к минерализованной жидкости составляет 10 мм2/мл. 3.1.3 Рассчитанный раствор минерализации in vitro добавьте в бутыль из политетрафторэтилена, предварительно нагрейте до 37°С, поместите пробу в шейкер с постоянной температурой при 37°С, 100 об/мин. Образцы извлекали в указанное время, промывали поочередно деионизированной водой и ацетоном, а затем помещали в электрическую сушильную печь с постоянной температурой при 105°C на 24 часа для получения минерализованных образцов для последующего тестирования. Примечание. При необходимости можно собрать надосадочную жидкость для обнаружения изменений концентрации ионов, связанных с минерализацией. 3.2 Порошковые материалы 3.2.1 Для порошковых материалов дозировка рассчитывается из расчета 100 мл раствора минерализации in vitro на грамм порошка. 3.2.2 Рассчитанный раствор минерализации in vitro помещают в бутылку из политетрафторэтилена или стеклянную колбу Эрленмейера, закупоривают, предварительно нагревают до 37°С, помещают пробу и помещают при постоянной температуре 37°С и 100°С. ;об/мин Взболтать в шейкере. Образцы извлекали в указанное время, промывали поочередно деионизированной водой и ацетоном, а затем помещали в электрическую сушильную печь с постоянной температурой при 105°C на 24 часа для получения минерализованных образцов для последующего тестирования. Примечание. При необходимости можно собрать надосадочную жидкость для обнаружения изменений концентрации ионов, связанных с минерализацией. 4Испытание и характеристика образца 4.1Анализ сканирующего электронного микроскопа проводится в соответствии с JY/T0584, при этом наблюдаются поверхность образца и морфология продуктов минерализации с разным временем реакции, и встречаются игольчатые или листовидные кальций-фосфорные продукты минерализации. Сравнивая изображения, полученные сканирующей электронной микроскопией при различных временах выдержки, мы можем определить, увеличивается ли производство минерализованного продукта HCA. 4.2. Инфракрасный спектральный анализ проводится в соответствии с GB/T6040, наблюдают за характерными пиками поглощения минерализованных продуктов, выдержанных в течение разного времени, и используют его для определения наличия в конечном итоге HCA с низкой кристалличностью. и качественно проанализировать его формирование. 4.3 Рентгеноструктурный анализ проводят в соответствии с рентгеноструктурным методом 0451 в общих правилах Фармакопеи Китайской Народной Республики (издание 2020 г. № 4), для анализа минерализации. продукты при разном времени реакции в сочетании с их характеристическими дифракционными пиками: JCPDS: 2θ=25,9° (002), 31,8° (211), 39,8° (310), 46,7° (222), 49,5° (213), 53,1° ( 004) для дальнейшего уточнения видов продуктов минерализации и степени кристаллизации.

T/CSBM 0026-2022 История

• 2022 T/CSBM 0026-2022 Метод испытания минерализации биоактивного стекла in vitro